现代生物科技专题-现代生物科技专题知识点

（1）同种限制性核学科王酸内切酶（或同种限制酶）； DNA分子杂交（或核酸探针）

（2）超数排卵； 获能（处理）

（3）显微注射法； 性别鉴定；  全能性

（4）（或人组织纤溶酶原激活物）

解析（1）用同种限制酶切割质粒和含有基因的DNA片段可产生相同的黏性末端，便于构建基因表达载体；通常采用DNA分子杂交技术来检测目的基因是否已插入受体细胞DNA。

（2）学科王为获得更多的学科学科王王卵母细胞，通常对供体母羊注射促性腺激素使其超数排卵；采集的精子需要经过获能处理才具备受精能力。学科王

（3）通常用显微注射法将重组表达载体导入学科王动物的受精卵；为了获得母羊，移植前需要对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定；早期胚胎细胞具有全能性，可利用胚胎分割和胚胎移植技术获得多个转基因个体。

（4）ht—PA基因的表达产物为人组织纤溶酶原激活物，若在转基因母羊的羊乳中检测到人组织纤溶酶原激活物，说明目的基因成功表达。

高考生物选修3高考考得都是很基础的，完全凭记忆就行了。建议你还是自己到辅导书去自己归纳总结吧，自己归纳的总会有所感悟，也很有益处的。

例如专题一的：限制性内切酶（专一性）DNA连接酶质粒的必要条件（1在宿主细胞中能大量保存并且自我复制2有一个或多个限制酶切点3有标记基因4对手体细胞无害）

基因工程的基本顺序：1目的基因的获取

2基因表达载体的构建（重要）啥启动子终止子也记下

3将目的基因导入受体细胞

4目的基因的检测与鉴定

导入方法：农杆菌转化法（植物）显微注射法（动物）钙离子转化法（细菌）

检测与鉴定：DNA分子杂交分子杂交（抗原抗体杂交（蛋白资）

专题一重要的也就这些了，在一些细节自己去看书吧。学生物关键还是要看书呀，高考答案都在书上，这个才是基本！！！！！！！！

 选修3《现代生物科技专题》知识点                                                    

专题1  基因工程

1基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术或基因拼接技术

2．基因工程的基本工具包括“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）、“分子缝合针”——DNA连接酶、“分子运输车”载体

3限制性核酸内切酶主要是从原核生物中分离纯化出来的。它能够识别双链

DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。

4根据酶的来源不同，DNA连接酶可分为两大类，一类是从大肠杆菌中分离得到的，称为E· DNA连接酶，另一类是从T4噬菌体中分离出来的，称为

T4 DNA连接酶，这两种连接酶的相同点是都缝合磷酸二酯键。

5作为载体具备的条件：

①具有复制起点，能在受体细胞中复制并稳定保存。

②具有一至多个限制酶切割点，供外源DNA片段插入。

③具有遗传标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。

6最常用的载体是质粒它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之

外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。除质粒外，常用的载体还有：

噬菌体的衍生物、动植物病毒。在基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，

都是在天然质粒的基础上经过人工改造成的。

7基因工程的原理是基因重组，基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：

目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基

因的检测和表达。

8目的基因是指编码蛋白质的结构基因，可以从自然界已有的物种中直接分离获得，也可以人工合成。人工合成目的基因的常用方法有PCR法、反转录法和化学合成法。

9PCR技术扩增目的基因的原理是DNA双链复制，过程是：第一步：加热至90～95℃DNA受热变性后解为单链；第二步：冷却到55～60℃，引物与单链相应互补序列结合；第三步：加热至70～75℃， DNA聚合酶从引物起始进行互补链的合成。

10构建基因表达载体是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能够表达和发挥作用。一个基因表达载体的组成必须有目的基因、启动子、终止子、标记基因。

11启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出，最终获得所需的蛋白质。终止子也是一段有特殊结构的DNA片段 ，位于基因的尾端。标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。

12转化是指目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的

过程。将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是 农杆菌转化法，其次还

有 基因枪法和 花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞：最常用的方法是

 显微注射技术。此方法的受体细胞多是 受精卵。将目的基因导入微生物细胞

时，常用原核生物作为受体细胞，原因是原核生物繁殖快、多为单细胞、遗传

物质相对较少 ，最常用的原核细胞是 大肠杆菌 ，其转化方法是：先用 Ca2  

处理细胞，使其成为  感受态细胞 ，再将 重组表达载体DNA分子 溶于缓冲

液中与感受态细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，完成

转化过程。

13目的基因导入受体细胞后，是否稳定维持和表达，需要进行检测。首先要检

测 转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用 DNA分子杂

交技术。其次还要检测 目的基因是否转录出了，方法是用标记的目的基

因作探针与杂交。最后检测 目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基

因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原－抗体杂交。有时还需进行个

体生物学水平的鉴定。如 转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。

14基因工程飞速发展，应用广泛，植物基因工程主要用于提高农作物的抗逆能力，（如抗虫、抗病、抗干旱、抗除草剂等）以及改良农作物的品质和利用植物生产药物等方面；动物基因工程主要用于提高动物生长速率、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物、用转基因动物作器官移植的供体。

15蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。